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DNA合成仪的原理

发布时间:2014年01月27日发布人:百力格生物技术关注度:1332

合成过程
        第一个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用苯甲酸保护,然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。
1)1个碱基的5’-OH和下个碱基的3‘-OH形成亚磷酸三酯,
2)然后用碘氧化成磷酸三酯
3)加入二氯乙酸除去第二个碱基5’-OH上的保护剂DMT
循环进行加入下一个碱基


合成完毕后
1)用苯硫酚除去5’-OH上的保护剂DMT
2)用浓氢氧化铵将片段与固体树脂断开,洗脱
3)用浓氢氧化铵在加热的条件下除去碱基上的保护剂
4)除去氢氧化铵,真空抽干
5)液相色谱或者PAGE,回收片段最长的。

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